Если коротко
- Цитоцентрифуга — настольная центрифуга с ротором под цитоворонки: клетки оседают прямо на предметное стекло.
- Подходит для малоклеточных жидкостей: ликвор, выпоты, моча, мокрота, смывы, пунктаты.
- Главные параметры выбора — число гнёзд за цикл (6 или 12), максимальное ОЦУ и тип ротора: под цитоворонки или под пробирки.
- В линейке KADAMM четыре модели: ЦФ-ЦТ301, ЦФ-ЦТ401, ЦФ-ЦТ402 и ЦФ-ЦТ403 — от 730 до 2170 ×g.
Что такое цитоцентрифуга и чем она отличается от обычной
Обычная лабораторная центрифуга осаждает клетки на дно пробирки. Дальше лаборант сливает надосадок, ресуспендирует осадок и наносит каплю на стекло — на каждом шаге часть клеток теряется, а мазок получается неравномерным. Цитоцентрифуга устроена иначе: проба заливается в цитоворонку, которая плотно прижата к предметному стеклу через фильтровальную карту с отверстием. Во время вращения клетки летят прямо на стекло и оседают в пятне, а жидкость уходит в фильтр.
Получается цитопрепарат — монослой клеток в чётко ограниченной зоне. Его окрашивают теми же методами, что и мазок, но смотреть его быстрее: клетки не перекрывают друг друга, морфология сохранена, а все клетки пробы собраны в одном пятне, а не размазаны по стеклу.
Где применяется
Основная область — клиническая цитология малоклеточных биологических жидкостей. В карточках цитологических центрифуг KADAMM перечислены асцитическая, плевральная, перикардиальная и суставная жидкости, ликвор, моча, мокрота, пунктаты и бронхиальные смывы. Отдельная задача — онкоцитология: поиск атипичных клеток в выпотах, где каждая клетка на счету. Модели с ротором под пробирки используют и для жидкостной цитологии.
| Материал | Что ищут | Почему нужна цитоцентрифуга |
|---|---|---|
| Ликвор | Клеточный состав, опухолевые клетки | Клеток единицы на микролитр — без концентрирования стекло почти пустое |
| Плевральная, асцитическая жидкость | Атипичные клетки, воспаление | Большой объём, мало клеток: нужен монослой без наложений |
| Моча | Клетки уротелия, атипия | Клетки быстро разрушаются — важна короткая подготовка |
| Бронхиальные смывы, мокрота | Клеточный состав, атипия | Неоднородный материал: равномерное пятно упрощает подсчёт |
Как устроен процесс: от пробы до окрашенного стекла
Порядок общий для всех моделей с цитоворонками; режим (скорость и время) задаёт методика лаборатории.
Режим центрифугирования — скорость, время и плавность разгона — задаёт методика лаборатории. Обычно цитопрепараты готовят на умеренных оборотах: сильное ускорение деформирует клетки, а резкий разгон срывает их с места до того, как фильтр заберёт жидкость. Поэтому у цитоцентрифуг важны точность поддержания скорости и плавные ступени разгона, а не рекордные обороты.
Цитоворонки или пробирки
Ротор под цитоворонки сразу даёт готовое стекло — это классический вариант. Ротор под пробирки нужен, когда пробу сначала концентрируют центрифугированием, а мазок делают отдельно, или когда лаборатория работает по методике жидкостной цитологии. У KADAMM ЦФ-ЦТ403 ротор на 6 гнёзд принимает пробы 6×9, 6×15 и 6×30 мл, а ЦФ-ЦТ301 работает с роторами 0.5 мл×6 и 2 мл×12.
dКак выбрать цитологическую центрифугу
Сколько проб за цикл
Посчитайте пиковую загрузку: сколько стекол лаборатория готовит за одну серию. Двенадцать гнёзд — стандарт для цитологического отдела больницы, шесть — для небольшой лаборатории или для работы с объёмными пробами. Модели KADAMM ЦФ-ЦТ401 и ЦФ-ЦТ402 берут 12 цитоворонок за цикл, у ЦФ-ЦТ402 есть и ротор на 6.
Какое ускорение и управление
Для цитопрепаратов не нужен большой запас по ×g, но нужен запас по режимам: одна жидкость требует мягкого режима, другая — более плотного осаждения. Важнее точность скорости, программы и ступени разгона. У ЦФ-ЦТ402 — 10 ступеней разгона, таймер до 999 минут и прозрачный акриловый купол, через который видно пробы; у ЦФ-ЦТ401 — точность скорости ±10 об/мин и показ ОЦУ на дисплее.
Сравнение моделей KADAMM
| Модель | Скорость / ОЦУ | Ёмкость | Особенность |
|---|---|---|---|
| ЦФ-ЦТ301 | 3000 об/мин / 730 ×g | 0.5 мл×6 и 2 мл×12 | цитоспин с двумя роторами, программы |
| ЦФ-ЦТ401 | 3000 об/мин / 1026 ×g | 12 цитоворонок | точность ±10 об/мин, шум ≤60 дБ(A) |
| ЦФ-ЦТ402 | 4000 об/мин / 2170 ×g | 12 цитоворонок, ротор на 6 | концентрирование и мазок за один цикл |
| ЦФ-ЦТ403 | 4000 об/мин / 2170 ×g | 6×9 / 6×15 / 6×30 мл | ротор под пробирки, жидкостная цитология |
| Скорость | 3000 об/мин |
| ОЦУ | 730 × g |
| Ёмкость | 0.5 мл×6 / 2 мл×12 |
| Скорость | 3000 об/мин |
| ОЦУ | 1026 × g |
| Ёмкость | 12 цитоворонок |
| Скорость | 4000 об/мин |
| ОЦУ | 2170 × g |
| Ёмкость | 12 цитоворонок |
| Скорость | 4000 об/мин |
| ОЦУ | 2170 × g |
| Ёмкость | 6×30 мл |
Подготовка пробы перед загрузкой
Качество цитопрепарата закладывается до центрифуги. Биологические жидкости доставляют в лабораторию как можно быстрее: клетки ликвора и мочи начинают разрушаться уже в первые часы, а в выпотах со временем меняется морфология. Если пробу нельзя обработать сразу, порядок хранения и консервации определяет методика лаборатории.
Концентрация клеток
Объёмные выпоты сначала концентрируют в обычной центрифуге, а в цитоворонку вносят уже ресуспендированный осадок нужной плотности. Малоклеточный ликвор, наоборот, вносят целиком без предварительного осаждения. Мутные и кровянистые пробы разводят, иначе клетки лягут слоями и перекроют друг друга. Удобно сделать пробное стекло и по нему скорректировать разведение для всей серии.
Сборка держателей
Стекло, фильтровальная карта и цитоворонка собираются в держателе так, чтобы отверстие карты совпало с выходом воронки. Карта должна быть сухой и подходящего размера: если она смещена, жидкость подтекает под воронку, пятно размывается и часть клеток уходит в фильтр. Стёкла маркируют заранее — после центрифугирования их легко перепутать.
Безопасность работы с биоматериалом
Биологические жидкости потенциально инфицированы, поэтому цитоцентрифугу используют как любое оборудование для работы с биоматериалом. Держатели и воронки собирают и разбирают в перчатках, ротор не открывают до полной остановки — у моделей KADAMM крышка блокируется электрозамком, а превышение скорости и дисбаланс контролируются автоматически. Камеру из нержавеющей стали после работы обрабатывают дезинфицирующим средством, совместимым с материалами ротора, а одноразовые фильтровальные карты утилизируют как медицинские отходы.
Типичные ошибки при работе
- Сухая фильтровальная карта не по размеру — жидкость подтекает под воронку, пятно размыто.
- Слишком густая проба — клетки ложатся слоями; суспензию разводят.
- Высокое ускорение «для надёжности» — клетки деформируются, ядра выглядят иначе.
- Долгое ожидание после забора — клетки в моче и ликворе разрушаются, обрабатывать пробу нужно быстро.
- Неуравновешенный ротор — пустые гнёзда заполняют холостыми воронками, иначе срабатывает защита по дисбалансу.